Antagonistic activity of lactic acid bacteria isolated from Minas artisanal cheeses against Brucella abortus / Atividade antagonista de bactérias lácticas isoladas de queijos Minas artesanais contra Brucella abortus

This study aimed to evaluate methods for studying the in vitro antimicrobial activity of lactic acid bacteria (LAB) against Brucella abortus and to evaluate the antagonistic effect of LAB on the viability of this pathogen. A total of 18 LAB strains (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; and Lactobacillus brevis,n = 2), isolated from Minas artisanal cheeses produced in three regions (Canastra, Campos das Vertentes, and Araxá) of Minas Gerais State, Brazil, were tested for their antimicrobial activity against B. abortus using three methods: spot-on-lawn, agar well diffusion assay, and antagonistic activity of the culture supernatants. None of the tested LAB strains could inhibit B. abortus in the spot-on-lawn and agar-well diffusion assays. The supernatants produced by LAB had an acidic pH, with intensity depending on bacterial growth and strain, and could inhibit the growth of B. abortus. In contrast, pH-neutralized (pH 7.0) LAB supernatants did not suppress the growth of B. abortus. The results showed that the best technique to study the in vitro antagonism of LAB against B. abortus was the antagonistic activity of culture supernatants. The growth of B. abortus may have been inhibited by acid production.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar métodos de estudo in vitro da atividade antimicrobiana de bactérias lácticas contra Brucella abortus e avaliar o efeito antagônico das mesmas sobre a viabilidade deste patógeno. Um total de 18 amostras de bactérias lácteas (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; e Lactobacillus brevis, n = 2), isoladas de exemplares de Queijo Minas Artesanal produzidos em três regiões (Canastra, Campos das Vertentes e Araxá) do estado de Minas Gerais, Brasil, foram testados quanto à sua atividade antimicrobiana contra B. abortus usando três métodos: spot-on-lawn, ensaio de difusão em poço e atividade antagonista de sobrenadante de cultura. Nenhuma das cepas testadas foi capaz de inibir B. abortus nos ensaios spot-on-lawm e de difusão em poço. Os sobrenadantes produzidos pelas bactérias lácteas apresentaram pH ácido, com intensidade dependente do crescimento bacteriano e da amostra, podendo inibir o crescimento de B. abortus. Em contraste, os sobrenadantes com pH neutralizado (pH 7,0) não inibiram o crescimento de B. abortus. Os resultados mostraram que a melhor técnica para estudar o antagonismo in vitro de bactérias lácteas contra B. abortus foi a atividade antagonista de sobrenadante de cultura. O crescimento de B. abortus pode ter sido inibido pela produção de ácido.(AU)

Levantamento sorológico de brucelose em bovinos monitorados no estado da Bahia / Serological survey of brucellosis in cattle monitored in the estate of Bahia

A brucelose é uma doença bacteriana de grande importância para a economia pecuária e para a saúde pública por se tratar de uma zoonose. É uma doença infecto-contagiosa que tem com agente etiológico bactérias do gênero Brucella. Em bovinos, as espécies do gênero é a Brucella abortus, que são cocobacilos gram negativo, intracelulares facultativos, imóveis e não esporulado. A infecção apresenta evolução crônica e acomete animais de todas as idades, sendo mais frequente em indivíduos sexualmente maduros. O objetivo desse trabalho é investigar, por meio da sorologia para brucelose bovina, utilizando a técnica do ELISA indireto, amostras de animais reagentes abatidos em frigoríficos inspecionados no estado da Bahia. Foram utilizados 666 animais, selecionados aleatoriamente no momento do abate. O sangue foi coletado com finalidade de obtenção de soro, todas as amostras foram submetidas à prova de triagem do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), prova do 2mercaptoetanol (2-ME) e ELISA Indireto. Das amostras reagentes no teste do AAT, obteve-se uma prevalência estimada em 1,2%. A prevalência no teste do ELISA foi de 13,21% (n=86). Esse resultado sugere a ocorrência de falsos negativos quando se utiliza a prova do antígeno acidificado tamponado.

Brucellosis is a bacterial disease of great importance to the livestock economy and to public health because it is a zoonosis. It is an infectious disease that has etiologic agent with bacteria of the genus Brucella. In cattle, the species of the genus Brucella is Brucella abortus that are gram negative, facultative intracellular, real estate and not sporulated. The infection presents chronic and affects animals of all ages, being more frequent in sexually mature individuals. This study aimed to investigate through serology for brucellosis, using the technique of indirect ELISA, samples from positive animals slaughtered in slaughterhouses inspected in the state of Bahia. A total of 666 animals were used, randomly selected at the time of slaughter. Blood was collected in order to obtain serum, all samples were subjected to a screening test Antigen Buffered Acidified (AAT), proof of 2-mercaptoethanol (2-ME) and Indirect ELISA. Of reagents in the test samples of AAT obtained an estimated prevalence of 1.2%. The prevalence in the ELISA test was 13.21% (n = 86). This result suggests the occurrence of false negatives when using the buffered acidified antigen test.

COVID-19 and zoonoses in Brazil: Environmental scan of one health preparedness and response.

The emergence of the COVID-19 pandemic reinforced the central role of the One Health (OH) approach, as a multisectoral and multidisciplinary perspective, to tackle health threats at the human-animal-environment interface. This study assessed Brazilian preparedness and response to COVID-19 and zoonoses with a focus on the OH approach and equity dimensions. We conducted an environmental scan using a protocol developed as part of a multi-country study. The article selection process resulted in 45 documents: 79 files and 112 references on OH; 41 files and 81 references on equity. The OH and equity aspects are poorly represented in the official documents regarding the COVID-19 response, either at the federal and state levels. Brazil has a governance infrastructure that allows for the response to infectious diseases, including zoonoses, as well as the fight against antimicrobial resistance through the OH approach. However, the response to the pandemic did not fully utilize the resources of the Brazilian state, due to the lack of central coordination and articulation among the sectors involved. Brazil is considered an area of high risk for emergence of zoonoses mainly due to climate change, large-scale deforestation and urbanization, high wildlife biodiversity, wide dry frontier, and poor control of wild animals' traffic. Therefore, encouraging existing mechanisms for collaboration across sectors and disciplines, with the inclusion of vulnerable populations, is required for making a multisectoral OH approach successful in the country.

An uncommon case of brucellosis with ocular presentation / Um caso incomum de brucelose com apresentação ocular

ABSTRACT We report an unusual case of brucellosis presented with headache, diminished vision, papillitis and multiple peripapillary hemorrhages accompanied by subretinal fluid extending up to macula. Diagnosis of brucellosis was made based on positive polymerase chain reaction of cerebrospinal fluid sample for Brucella species DNA, accompanied by a raised titer of anti-brucella antibodies. Patient showed remarkable improvement on triple drug therapy in form of doxycycline, rifampicin and ceftriaxone.

RESUMO Relatamos um caso incomum de brucelose apresentada com cefaleia, visão diminuída, papilite e múltiplas hemorragias peripapilares acompanhadas por fluido sub-retinal, estendendo-se até a mácula. O diagnóstico de brucelose foi feito com base na reação em cadeia da polimerase positiva de amostra de líquido cefalorraquidiano para DNA de espécies de Brucella, acompanhada por um título elevado de anticorpos antibrucela. O paciente apresentou melhora notável com a terapia tripla com drogas na forma de doxiciclina, rifampicina e ceftriaxona.

First study of Brucella ovis antibodies in purebred sheep flocks in the State of Parana, Brazil / [Primeiro estudo de anticorpos para Brucella ovis em rebanhos de ovinos puros de Origem, no estado do Paraná, Brasil]

Brucella ovis, a non-zoonotic species, is the etiological agent of ovine brucellosis, an infectious disease of clinical or subclinical occurrence in sheep flocks. Until then, there is no serological study of anti-Brucella ovis antibodies in purebred sheep herds. This study aimed to determine the presence of anti-Brucella ovis antibodies in purebred sheep flocks with breeding purposes from Parana State. Blood samples from 728 animals, of which 563 were females and 165 males, between 8 and 56 months of age from the six major sheep producing mesoregions of Parana, were submitted to detection of anti-Brucella ovis antibodies by the Agar Gel Immunodiffusion technique using an antigen from the bacteria Brucella ovis (Reo 198). The results indicate the presence of this disease in purebred sheep from Parana State in a low occurrence of 0.27% (2/728). The only two positive animals were rams, Santa Inês breed, from the same flock in the East Center region of Parana, without clinical disease. In conclusion, Brucella ovis is present in purebred sheep in Parana State, Brazil, and this low occurrence may have occurred due to rigorous breeding systems that may contribute to reduce the transmission of this disease.(AU)

Brucella ovis, espécie não zoonótica, é o agente etiológico da brucelose ovina, doença infecciosa de ocorrência clínica ou subclínica. Atualmente, não existe estudo sorológico de anticorpos anti-Brucella ovis em rebanhos de ovinos puros de origem. Este estudo teve como objetivo determinar a presença de anticorpos anti-Brucella ovis em rebanhos ovinos de raça pura de origem, com fins reprodutivos do estado do Paraná. Amostras de sangue de 728 animais, sendo 563 fêmeas e 165 machos, entre oito e 56 meses de idade, pertencentes a seis principais mesorregiões produtoras de ovinos no Paraná, foram submetidas à detecção de anticorpos anti-Brucella ovis pela técnica de imunodifusão em ágar gel usando-se um antígeno da bactéria Brucella ovis (Reo 198). Os resultados indicam a presença da doença em ovinos puros de origem do estado do Paraná em baixa ocorrência de 0,27% (2/728). Os dois únicos animais positivos foram reprodutores da raça Santa Inês, do mesmo rebanho da região Centro Leste do Paraná, sem manifestação clínica. Em conclusão, Brucella ovis está presente em ovinos puros de origem no estado do Paraná, e essa baixa ocorrência pode ter ocorrido devido a sistemas rigorosos de criação, que podem contribuir para a redução da transmissão dessa doença.(AU)

Interactive web-based tool for evaluating the spread of bovine tuberculosis and brucellosis in Colombia / Herramienta interactiva basada en la web para evaluar la propagación de la tuberculosis bovina y la brucelosis en Colombia / Ferramenta interativa baseada na web para avaliar a disseminação da tuberculose e brucelose bovina na Colômbia

Abstract Background: Bovine tuberculosis (BTB) and brucellosis are associated with devastating losses in the livestock sector in Colombia and even in developed countries. Real-time disease surveillance is a key strategy to control and eradicate infectious disease outbreaks. Objective: To design an epidemiological tool for monitoring BTB and brucellosis in Colombia. Methods: An interactive platform for disease mapping of BTB and brucellosis during an observation period between years 2004 and 2019 was designed. Results: Our analysis showed that the provinces of Cundinamarca and Valle del Cauca are regions affected by BTB and brucellosis epidemics, respectively (p<0.001). Furthermore, increased case detection of BTB was reported in 2012 and brucellosis in 2019 (p<0.001). Conclusions: This epidemiological platform allows tracking BTB and tuberculosis hotspots, identifying trends over time, and provides useful information to animal health authorities for designing new strategies in control programs.

Resumen Antecedentes: La tuberculosis bovina (TBB) y la brucelosis están asociadas con problemas persistentes en la ganadería Colombiana e incluso en los países desarrollados. La vigilancia de enfermedades en tiempo real es una estrategia clave para controlar y erradicar brotes de enfermedades infecciosas. Objetivo: Diseñar una herramienta epidemiológica para monitorear TBB y brucelosis en Colombia. Métodos: Se diseñó un panel de control interactivo para el mapeo de ambas enfermedades durante el periodo de observación entre los años 2004 y 2019. Resultados: El análisis de la herramienta mostró que las Provincias de Cundinamarca y Valle del Cauca han sido áreas epidémicas para TBB y brucelosis, respectivamente (p<0,001). Además, se encontró un aumento de la detección de casos de TBB en 2012 y de brucelosis durante 2019 (p<0,001). Conclusiones: Este panel epidemiológico permite el seguimiento de puntos críticos de TBB y tuberculosis, identificando sus tendencias a lo largo del tiempo, y proporciona información útil para las autoridades de sanidad animal que diseñan nuevas estrategias para los programas de control.

Resumo Antecedentes: A tuberculose bovina (TBB) e a brucelose estão associadas a problemas persistentes no campo da pecuária na Colômbia e até em países desenvolvidos. Portanto, a vigilância de doenças em tempo real é uma estratégia essencial para controlar e erradicar surtos de doenças infecciosas. Objetivo: Projetar uma ferramenta epidemiológica para monitorar a TB e a brucelose na Colômbia. Métodos: Um painel de controle interativo foi projetado para o mapeamento de ambas as doenças entre 2004 e 2019 como período de observação. Resultados: A análise da ferramenta mostrou que as Províncias de Cundinamarca e Valle del Cauca foram áreas epidêmicas para TBB e brucelose, respectivamente (p<0,001). Além disso, foi encontrado um aumento na detecção de casos em 2012 para TBB e brucelose durante 2019 (p<0,001). Conclusões: Esse painel epidemiológico poderia permitir o monitoramento de pontos críticos dessas doenças, identificando tendências ao longo do tempo, fornecendo informações úteis para as autoridades de saúde animal que elaboram novas estratégias para programas de controle.

Antibody prevalence of Leptospira spp. and Brucella abortus in domestic cats from Araguaína, Tocantins, North Region of Brazil / Prevalência de anticorpos para Leptospira spp. e Brucella Abortus em gatos domésticos de Araguaína, Tocantins, Região Norte do Brasil

Leptospira spp. and Brucella abortus are bacterial pathogens that can infect humans and animals. The present study aimed to detect anti-Leptospira and anti-B. abortus antibodies and verified the presence of factors associated with seropositivity in cats. One hundred and eighty serum samples were collected from domestic cats (Felis silvestris catus) from the urban area of the municipality of Araguaína-Tocantins by phlebocentesis of the cephalic and jugular veins. The samples were subjected to detection of anti-Leptospira and anti-B.abortus antibodies, respectively, by microscopic seroagglutination and buffered acidified antigen testing, followed by confirmation by the 2-mercaptoethanol test and slow seroagglutination in tubes. Data from the epidemiological questionnaire (the age, sex, origin, breed, and presence of clinical signs) were analyzed using Epi Info® software with seropositivity data found to search for associated factors using the chi-square test. In the present study, the prevalence of Leptospira spp. was 5.56% (10/180). However, no sample was reactive to B. abortus. None of the studied variables were associated with seropositivity for the pathogens evaluated. Therefore, there is contact between Leptospira spp. and the feline population of the municipality, indicating the possibility of the circulation of pathogenic serovars and that the presence of anti-Leptospira antibodies does not depend on the variables analyzed.

Leptospira spp. e Brucella abortus são patógenos bacterianos que podem infectar humanos e animais. O presente estudo teve como objetivo detectar anticorpos anti-Leptospira e anti-B.abortus e verificar a presença de fatores associados com a soropositividade em gatos. Foram coletadas 180 amostras de soro de gatos domésticos (Felis silvestris catus) da zona urbana do município de Araguaína-Tocantins por flebocentese das veias cefálica e jugular. As amostras foram submetidas à detecção de anticorpos anti-Leptospira e anti-B. abortus, respectivamente, por soroaglutinação microscópica e teste do antígeno acidificado tamponado, seguido de confirmação pelo teste de 2-mercaptoetanol e soroaglutinação lenta em tubos. Os dados do questionário epidemiológico (idade, sexo, procedência, raça e presença de sinais clínicos) foram analisados no software Epi Info® com os dados de soropositividade encontrados para pesquisa de fatores associados pelo teste do qui-quadrado. No presente estudo, a prevalência de Leptospira spp. foi de 5,56% (10/180). No entanto, nenhuma amostra foi reativa para B. abortus. Nenhuma das variáveis estudadas foi associada com a soropositividade para os patógenos avaliados. Portanto, há contato entre Leptospiraspp. e a população felina do município, indicando a possibilidade de circulação de sorovares patogênicos e que a presença de anticorpos anti-Leptospira independe das variáveis analisadas.

Occupational infection to Brucella abortus B19 vaccine despite antimicrobial prophylaxis / Infecção ocupacional pela cepa vacinal de Brucella abortus B19 apesar de profilaxia antimicrobiana

ABSTRACT: The authors report the case of a veterinarian who acquired brucellosis infection by accidental exposure to Brucella abortus vaccine (BRUCEL-VET B19) while performing animal vaccination. Antibiotic prophylaxis with doxycycline and rifampin for six weeks was indicated, but rifampin was discontinued after 10 days due to gastrointestinal in-tolerance. Despite prophylaxis, the patient seroconverted after 30 days, but was asymptomatic and did not require additional antibiotic therapy. Post-exposure prophylaxis of Brucella is not free from side effects and asymptomatic seroconversion can occur despite prophylaxis. (AU)

RESUMO: Os autores relatam o caso de um veterinário que adquiriu infecção por brucelose por exposição acidental à vacina Brucellaabortus (BRUCEL-VET B19) durante a vacinação animal. A profilaxia antibiótica com doxiciclina e rifampici-na por seis semanas foi indicada, mas a rifampicina foi descontinuada após 10 dias devido à intolerância gastroin-testinal. A profilaxia pós-exposição de Brucella não está isenta de efeitos colaterais e a soroconversãoassintomática pode ocorrer apesar da profilaxia. (AU)

Risk factors and detection of brucella ovis in naturally infected rams and ewes / Fatores de risco e detecção de brucella ovis em carneiros e ovelhas naturalmente infectados

The objective of this study was to verify the occurrence of ovine brucellosis using Agar Gel Immunodiffusion (AGID) and Polymerase Chain Reaction (PCR) techniques, as well as to identify the main risk factors associated with infection in sheep flocks belonging to municipalities in the microregion from Teresina, PI, Brazil. A total of 100 urine and blood samples were collected from sheep aged 6 months or older. The urine samples were submitted to conventional PCR and the blood samples were examined by the AGID technique. Of the 100 blood samples, 17 (17%) were reactive to the AGID test. In conventional PCR of 100 urine samples, six (6%) were positive. Risk factors associated to infection by B. ovis included the rearing system (OR=0.19), feed management (OR=0.05), presence of dystotic births (OR=4.50), miscarriages (OR=3.75) and source of water offered to the animals (OR=0.19). Thus, it was concluded that it is possible to detect the occurrence of animals with ovine brucellosis since PCR is a reliable method to confirm infection. Furthermore, there are risk factors associated to infection by B. ovis in the municipalities studied.

Objetivou-se verificar a ocorrência da brucelose ovina através das técnicas de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), bem como identificar os principais fatores de risco associados à infecção nos rebanhos ovinos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, PI, Brasil. Foram colhidas 100 amostras de urina e de sangue de ovinos com idade superior ou igual a seis meses. As amostras de urina foram submetidas a PCR convencional e as amostras de sangue à técnica de IDGA. Das 100 amostras de sangue 17 (17%) foram reagentes ao teste de IDGA. Já na PCR convencional das 100 amostras de urina, seis (6%) foram positivas. Ressalta-se que três animais foram positivos em ambos os testes. Como fatores associados à infecção por B. ovis, observou-se o tipo de sistema de criação (OR=0,19), o manejo alimentar (OR=0,05), presença de partos distócicos (OR=4,50), abortamentos (OR=3,75) e a fonte de água fornecida aos animais (OR=0,19). Assim, conclui-se que foi possível detectar a ocorrência de animais com brucelose ovina, uma vez que a PCR é um método confirmatório. Além disso, há fatores de risco associados à infecção por B. ovis nos municípios estudados.

Risk factors and detection of brucella ovis in naturally infected rams and ewes / Fatores de risco e detecção de brucella ovis em carneiros e ovelhas naturalmente infectados

The objective of this study was to verify the occurrence of ovine brucellosis using Agar Gel Immunodiffusion (AGID) and Polymerase Chain Reaction (PCR) techniques, as well as to identify the main risk factors associated with infection in sheep flocks belonging to municipalities in the microregion from Teresina, PI, Brazil. A total of 100 urine and blood samples were collected from sheep aged 6 months or older. The urine samples were submitted to conventional PCR and the blood samples were examined by the AGID technique. Of the 100 blood samples, 17 (17%) were reactive to the AGID test. In conventional PCR of 100 urine samples, six (6%) were positive. Risk factors associated to infection by B. ovis included the rearing system (OR=0.19), feed management (OR=0.05), presence of dystotic births (OR=4.50), miscarriages (OR=3.75) and source of water offered to the animals (OR=0.19). Thus, it was concluded that it is possible to detect the occurrence of animals with ovine brucellosis since PCR is a reliable method to confirm infection. Furthermore, there are risk factors associated to infection by B. ovis in the municipalities studied.

Objetivou-se verificar a ocorrência da brucelose ovina através das técnicas de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), bem como identificar os principais fatores de risco associados à infecção nos rebanhos ovinos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, PI, Brasil. Foram colhidas 100 amostras de urina e de sangue de ovinos com idade superior ou igual a seis meses. As amostras de urina foram submetidas a PCR convencional e as amostras de sangue à técnica de IDGA. Das 100 amostras de sangue 17 (17%) foram reagentes ao teste de IDGA. Já na PCR convencional das 100 amostras de urina, seis (6%) foram positivas. Ressalta-se que três animais foram positivos em ambos os testes. Como fatores associados à infecção por B. ovis, observou-se o tipo de sistema de criação (OR=0,19), o manejo alimentar (OR=0,05), presença de partos distócicos (OR=4,50), abortamentos (OR=3,75) e a fonte de água fornecida aos animais (OR=0,19). Assim, conclui-se que foi possível detectar a ocorrência de animais com brucelose ovina, uma vez que a PCR é um método confirmatório. Além disso, há fatores de risco associados à infecção por B. ovis nos municípios estudados.

Fluorescent polarization assay, two versions of indirect and competitive enzyme- linked immunoassay for brucellosis diagnosis in vaccinated buffaloes (Bubalus bubalis) / Teste de polarização fluorescente, duas versões de imunoensaio enzimático indireto e imunoensaio competitivo para diagnóstico de brucelose em búfalos vacinados (Bubalus bubalis)

ABSTRACT: The fluorescence polarization assay (FPA), two variants (V) of the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (I-ELISA) and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (C-ELISA) were evaluated in buffaloes to detect antibodies against Brucella spp. The V1 of I-ELISA identifies them through the monoclonal (M23) anti-bovine IgG (I-ELISAM23) and the V2 through the ProteinA / G (I-ELISA-A/G). Serum samples of 862 buffaloes (Bubalus bubalis) from the Northeast of Argentina (NEA) were analyzed using the complement fixation test (CFT) as the reference. Receiving Operator Characteristic (ROC) analysis defined for the area under the curve (AUC) determined the cutoff points, sensitivity (Se) and specificity (Sp) for each test. CFT identified 107 positive and 755 negative sera. The best AUC (0.986), Concordance with CFT (96.3%) and kappa value (0.843) was obtained by I-ELISA A/G test. This assay showed the highest Se (95.33%) and C-ELISA the highest Sp (97%). FPA failed to measure the antibodies in 23 (2.65%) serum samples due to unsuccessful reading. I-ELISA M23 proved to be ineffective to diagnose brucellosis in bubaline sera. The four serological tests showed cutoff points lower than those standardized for bovines. As conclusion, I-ELISA A/G, C-ELISA and FPA with its limitations would be effective techniques for the diagnosis of brucellosis in buffaloes in the NEA, requiring an appropriate cut-off point to guarantee their maximum performance in this species.

RESUMO: O ensaio de polarização de fluorescência (FPA), duas variantes (V) do ensaio imunoenzimático indireto (I-ELISA) e o ensaio imunoenzimático competitivo (C-ELISA), foram avaliados em búfalos para detectar anticorpos contra Brucella spp. O V1 do I-ELISA os identifica através do IgG monoclonal (M23) anti-bovino (I-ELISAM23) e o V2 ​​através da Proteína A / G (I-ELISA-A / G). Amostras de soro de 862 búfalos (Bubalus bubalis) do Nordeste da Argentina (NEA) foram analisadas usando o teste de fixação do complemento (CFT) como referência. A análise Receiving Operator Characteristic (ROC) definida pela área sob a curva (AUC) determinou os pontos de corte, sensibilidade (Se) e especificidade (Sp) de cada teste. A CFT identificou 107 soros positivos e 755 soros negativos. Os melhores valores de AUC (0.986), concordância com CFT (96.3%) e kappa (0.843) foram obtidos pelo teste I-ELISA A / G. Este ensaio mostrou a maior Se (95.33%) e C-ELISA a maior Sp (97%). O FPA falhou em medir os anticorpos em 23 (2,65%) amostras de soro devido à falha na leitura. O I-ELISA M23 provou ser ineficaz para o diagnóstico de brucelose em soros bubalinos. Os quatro testes sorológicos mostraram pontos de corte inferiores aos padronizados para bovinos. Em conclusão, I-ELISA A / G, C-ELISA e FPA com suas limitações seriam técnicas eficazes para o diagnóstico de brucelose em búfalos no NEA, exigindo um ponto de corte adequado para garantir seu desempenho máximo nesta espécie.

Meta-analysis of brucellosis vaccinology in natural hosts / Meta-análise da vacinologia de brucelose em hospedeiros naturais

Brucellosis is a relevant zoonotic disease for which the most important tool for control is vaccination of susceptible animals. Assessment of vaccine efficacy in natural hosts is based on prevention of abortion and Brucella infection in organs of immunized animals. A meta-analysis of experimental vaccination of Brucella spp. natural hosts was performed, including 45 PubMed and/or Scopus-indexed publications, representing 116 individual experiments. Difference of risk was calculated as an indicator of protection, and a temporal analysis (1980-2016) demonstrated that experimental vaccines tested on natural hosts provided levels of protection that were stable over the past decades. The meta-regression model developed in this study included different vaccine categories (attenuated, inactivated, mutant, subunit, and vectored) considering the difference of risk as the dependent variable. The subcutaneous route of vaccination provided better protection when compared to the intramuscular and oral routes of vaccination. Surprisingly, inactivated vaccines provided better protection than live naturally attenuated vaccine strains (spontaneous mutations) that were considered the reference, whereas subunit vaccines provided lower levels of protection. This is the first meta-analysis of Brucella vaccinology in the natural hosts. These results are useful for the development of new vaccination protocols for controlling animal brucellosis.(AU)

Brucelose é uma doença zoonótica relevante, para a qual a vacinação de animais susceptíveis é a ferramenta mais importante de controle. Avaliação da eficácia vacinal em hospedeiros naturais é baseada na prevenção de aborto e da colonização de órgãos pela Brucella spp. em animais imunizados. Foi realizada meta-análise de estudos de vacinação experimental de Brucella spp. em hospedeiros naturais, incluindo 45 publicações indexadas pela PubMed e/ou Scopus, representando 116 experimentos individuais. Diferença de risco foi calculada como indicador de proteção e uma análise temporal (1980-2016) demonstrou que vacinas experimentais testadas em hospedeiros naturais promoveram níveis de proteção que foram estáveis ao longo das últimas décadas. O modelo de meta-regressão desenvolvido neste estudo incluiu diferentes categorias de vacinas (atenuada, inativada, mutante, subunidade e vetorial) considerando a diferença de risco como variável dependente. A via de vacinação subcutânea promoveu melhor proteção quando comparada às vias intramuscular e oral. Surpreendentemente, vacinas inativadas promoveram melhor proteção que vacinas vivas atenuadas (com mutações espontâneas) que foram consideradas como referência, enquanto vacinas de subunidades promoveram menor proteção. Este é o primeiro estudo de meta-análise da vacinologia de Brucella em hospedeiros naturais. Estes resultados são úteis para o desenvolvimento de novos protocolos vacinais para controle de brucelose animal.(AU)

A real-time quantitative PCR based on molecular beacon for detecting Brucella infection / PCR quantitativo em tempo real, baseado em guia molecular para detecção de infeção por Brucella

O objetivo deste comunicado é desenvolver um método quantitativo PCR em tempo real, baseado em guia molecular (MB) (MB-qPCR) para detecção de infecção por espécies de Brucella, e avaliar seu potencial de utilização clínica. Os primers e as sondas MB foram desenhados para amplificação específica e determinação de sequência conservada do código do gene para os primeiros 58-aa da proteína de membrana externa OMP-2a, que é compartilhada em cinco espécies de Brucella epidêmicas. A avaliação metodológica foi realizada por análise de sensibilidade, especificidade, coeficiente de variação intra e inter, e a linearidade do qPCR. O potencial diagnóstico foi avaliado comparando-se o método qPCR desenvolvido com ensaios de exames bacteriológicos convencionais, incluindo os testes de soroaglutinação convencionais (SATs) e os testes do Rosa Bengala (RBPTs). O método exibiu alta sensibilidade (tão baixo quanto 50 cópias) e grande faixa de linearidade (102-108 cópias). Nenhuma reação cruzada foi encontrada com bactéria clínica comum. A sensibilidade diagnóstica foi superior ao exame bacteriológico, e a especificidade diagnóstica foi superior ao SAT ou ao RBPT. Um método MB-qPCR altamente sensível e específico para DNA de Brucella foi estabelecido com sucesso, provando ser uma ferramenta útil no diagnóstico molecular de brucelose.(AU)

Seroprevalence of Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis, and Maedi-Visna in sheep slaughtered in Minas Gerais State, Brazil / Soroprevalência de Brucella ovis, Brucella lisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-Visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to estimate the prevalence of antibodies against Brucella ovis-epididymitis, smooth-Brucella, leptospirosis, toxoplasmosis and Maedi-visna in sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil and to study their simultaneous occurrence, including caseous lymphadenitis, at sheep and flock levels. The study was conducted at a sheep slaughterhouse with Federal Inspection Service. Sera from 594 animals from 21 flocks were collected, in 2007. The agar gel immunodiffusion (AGID) was employed to detect anti-B. ovis and anti-Maedi Visna antibodies, whereas Rose Bengal (RB) and the 2-mercaptoethanol test (2ME) were used to test anti-smooth Brucella antibodies. For the detection of anti-Leptospiraantibodies, sera were examined by microscopic agglutination test (MAT), while for the detection of IgG antibodies to Toxoplasma gondii ELISA was used. Prevalence of antibodies against smooth Brucella, B. ovis-epididimitis, Leptospiraspp., toxoplasmosis and Maedi-Visna found in sheep from Minas Gerais was 0.00%, 24.04%, 25.96%, 10.46% and 3.08%, respectively; whereas the seroprevalence in flocks was 0.00%, 80.95%, 90.48%, 71.43% and 23.81%, respectively. Moreover, when data on antibodies anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previously obtained, were included, about 60% of the flocks showed animals that were exposed to four or more of the studied agents. However, only 25.47% of the sheep exhibited simultaneously antibodies against more than one pathogen. Thus, data from the present study on sheep slaughtered in Minas Gerais, Brazil, showed no antibodies to smooth-Brucella and a low frequency of antibodies anti-Maedi Visna lentivirus, and a high and widespread seroprevalence of B. ovis, Leptospira spp., and T. gondii among animals and flocks.(AU)

O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência de anticorpos contra Brucella ovis (epididimite ovina), Brucellalisa, leptospirose, toxoplasmose e Maedi-visna em ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, e estudar sua ocorrência simultânea, incluindo linfadenite caseosa, nos ovinos e nos rebanhos. O estudo foi realizado em um abatedouro de ovinos com Serviço de Inspeção Federal. Soros de 594 animais de 21 rebanhos foram coletados, em 2007. A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi empregada para detectar anticorpos anti-B. ovis e anticorpos anti-Maedi Visna, enquanto o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) e o teste de 2-mercaptoetanol (2ME) foram utilizados para testar anticorpos anti-Brucella lisa. Para a detecção de anticorpos anti-Leptospira, os soros foram examinados pelo teste de aglutinação microscópica (MAT), enquanto que para a detecção de anticorpos IgG para Toxoplasma gondii, foi usado o ELISA. A prevalência de anticorpos anti-Brucella lisa, B. ovis, Leptospira spp., toxoplasmose e Maedi-Visna encontrados em ovinos de Minas Gerais foi de 0,00%, 24,04%, 25,96%, 10,46% e 3,08%, respectivamente; enquanto a soroprevalência em rebanhos foi de 0,00%, 80,95%, 90,48%, 71,43% e 23,81%, respectivamente. Além disso, quando dados de anticorpos anti-Corynebacterium pseudotuberculosis, previamente obtidos, foram incluídos, cerca de 60% dos rebanhos apresentaram animais expostos a quatro ou mais dos agentes estudados. No entanto, apenas 25,47% dos ovinos exibiram simultaneamente anticorpos contra mais de um patógeno. Assim, os dados do presente estudo sobre ovinos abatidos em Minas Gerais, Brasil, mostram que ausência de anticorpos anti-Brucella lisa e baixa frequência de anticorpos anti-Maedi Visna, e uma soroprevalência alta e generalizada de B. ovis, Leptospira spp. e T. gondii entre animais e rebanhos.(AU)

Pathogenic potential of Brucella ovis field isolates with different genotypic profile and protection provided by the vaccine strain B. ovis ΔabcBA against B. ovis field isolates in mice / Vacina viva atenuada Brucella ovis Δ abcBA encapsulada protege camundongos frente a desafios de B. ovis isoladas de campo

Brucella ovis causes economic and reproductive losses in sheep herds. The goal of this study was to characterize infection with B. ovis field isolates in a murine model, and to evaluate protection induced by the candidate vaccine strain B. ovis ΔabcBA in mice challenged with these field isolates. B. ovis field strains were able to colonize and cause lesions in the liver and spleen of infected mice. After an initial screening, two strains were selected for further characterization (B. ovis 94 AV and B. ovis 266 L). Both strains had in vitro growth kinetics that was similar to that of the reference strain B. ovis ATCC 25840. Vaccination with B. ovis ΔabcBA encapsulated with 1% alginate was protective against the challenge with field strains, with the following protection indexes: 0.751, 1.736, and 2.746, for mice challenged with B. ovis ATCC25840, B. ovis 94 AV, and B. ovis 266 L, respectively. In conclusion, these results demonstrated that B. ovis field strains were capable of infecting and inducing lesions in experimentally infected mice. The attenuated vaccine strain B. ovis ΔabcBA induced protection in mice challenged with different B. ovis field isolates, resulting in higher protection indexes against more pathogenic strains.(AU)

Brucella ovis é responsável por perdas econômicas e reprodutivas em rebanhos ovinos. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a infecção com as cepas isoladas de campo de B. ovis em modelo murino e avaliar a eficiência vacinal da mutante B. ovis ΔabcAB para proteção contra desafio com as cepas isoladas de campo. Foram utilizadas sete cepas isoladas de campo foram capazes de colonizar e provocar lesões no fígado e no baço de camundongos após sete dias pós-infecção. Após triagem, duas cepas foram selecionadas para a melhor caracterização (B. ovis 94 AV and B. ovis 266L). Ambas apresentaram crescimento em placa de cultivo semelhante ao da cepa de referência B. ovis ATCC 25840. A vacinação com a cepa de Brucella ovis ΔabcBA encapsulada com alginato a 1% foi capaz de proteger camundongos desafiados com as cepas isoladas de campo, com os seguintes índices de proteção: 0,751, 1,736 e 2,746, para camundongos desafiados com B. ovis ATCC 25840, B. ovis 94 AV e B. ovis 266 L, respectivamente. Estes resultados demonstraram que as cepas isoladas de campo de B. ovis são capazes de infectar e induzir lesão em camundongos experimentalmente infectados. O uso da cepa mutante atenuada B. ovis ΔabcBA para vacinação de fêmeas C57BL/6 desafiados com diferentes cepas de B. ovis induziu proteção nos camundongos desafiados com diferentes cepas de B. ovis. Deste modo, mostrando-se eficiente na proteção das cepas de campo de B. ovis.(AU)

Certificação e controle de propriedades de produção leiteira livres de brucelose e tuberculose no Estado do Rio de Janeiro: experiência da PESAGRO-RIO na primeira certificação do Estado, os benefícios ao pequeno produtor e a oferta de produtos lácteos de qualidade ao consumidor / Certification and control of brucellosis and tuberculosis free dairy production properties in the State of Rio de Janeiro: experience of PESAGRO-RIO in first certification of the State, the benefits to the small producer and the supply of dairy products of quality to the consumer

A cadeia leiteira do estado do Rio de Janeiro tem grande importância econômica e social. Existem, aproximadamente, 15 mil propriedades rurais produtoras de leite no estado, com 406 mil vacas ordenhadas ao ano, totalizando 45 mil pessoas diretamente ligadas ao leite somente no campo. Este contingente de produtores, produzindo cerca de 513 milhões de litros de leite por ano, gera faturamento anual de R$ 670 milhões no campo. Porém, o desenvolvimento da produção leiteira fluminense não acompanha o crescente mercado consumidor do estado. Os incentivos, por meio de políticas públicas que beneficiem a produção leiteira, sobretudo a familiar, que compreende mais de 78% dos estabelecimentos rurais do estado, devem-se basear principalmente no tripé sanidade, reprodução e nutrição animal, além de incentivos fiscais e de fortalecimento da indústria láctea. O conhecimento da frequência das doenças dos rebanhos leiteiros, dos fatores que condicionam sua presença e possibilitam sua difusão são de fundamental importância no seu controle e/ou erradicação, garantindo, assim, a produção de alimentos seguros, saudáveis e nutritivos, em bases sustentáveis e competitivas. O presente trabalho apresenta a experiência da Empresa de Pesquisa Agropecuária do Estado de Janeiro (PESAGRO-RIO) na certificação de propriedades livres de Brucelose e Tuberculose, pela implementação de ações de controle e erradicação dessas doenças, por meio do diagnóstico sorológico da Brucelose e pela detecção da Tuberculose em propriedades familiares. O projeto teve como resultado a certificação da primeira propriedade livre de Brucelose e Tuberculose do estado no município de Carmo e a elaboração de uma linha de produção de derivados lácteos com matéria-prima proveniente de propriedades certificadas. Os produtos foram identificados com o “Selo de Qualidade Sanitária”, como ferramenta de agregação de valor, tendo como resultado o aumento de renda dos produtores e a segurança alimentar dos consumidores.

Levantamento epidemiológico visando à comparação das prevalências de Brucelose bovina através de “Ring Test” no município de Carmo-RJ, após 9 anos de vacinação de bezerras de 3 a 8 meses de idade / Epidemiological survey to compare the prevalence of bovine Brucellosis through a Ring Test in the city of Carmo-RJ, after 9 years of vaccination of heifers from 3 to 8 months of age

A equipe técnica do Centro Estadual de Pesquisa em Sanidade Animal Geraldo Manhães Carneiro (CEPGM), da Empresa de Pesquisa Agropecuária do Estado do Rio de Janeiro (PESAGRO-RIO), realizou em 2009, levantamento epidemiológico para Brucelose através do teste de triagem Teste do Anel do Leite (TAL) no município de Carmo. Foram testados 30 tanques de expansão, entre eles, comunitários, da Cooperativa e Laticínio local e tanques individuais. Como resultado do teste realizado no CEPGM, observou-se a prevalência de 38% para Brucelose bovina no município, indicando expressiva necessidade de aplicação de medidas de profilaxia e controle. Assim, foi instituída vacinação gratuita no município, em março de 2009. Durante 9 anos e 6 meses ininterruptos, foram vacinadas 18.777 bezerras. Em agosto de 2018, um novo levantamento epidemiológico foi realizado, procurando atingir os mesmos pontos de coleta do levantamento de 2009. Foi observada a prevalência de 6,6% para Brucelose, representando a expressiva redução de 83% na prevalência da doença nos rebanhos do município em questão.

Development and standardization of a western blotting test for detection of antibodies against B. abortus / Desenvolvimento e padronização do teste Western blotting para detecção de anticorpos contra B. abortus

Brucellosis is an infectious disease caused by bacteria of the genus Brucella spp. with diagnosis based on use of serological techniques. The present study aimed to develop and standardize a western blotting (WB) test for detection of antibodies against B. abortus. Samples from two groups of cattle were analyzed: group I: 60 serum samples from true positive and true negative vaccinated animals (30 positive samples from infected animals according to rose bengal test (RBT), 2-mercaptoethanol, serum agglutination test (SAT) and complement fixation test (CFT) and 30 RBT negatives samples); group II: 383 field samples (90 positive and 293 CFT negative sera). The most reactive band in the western blotting, which properly identified and separated infected from non - infected had a molecular weight of ≤ 20kDa. The sensitivity, specificity and accuracy of the WB compared to RBT was 93%, 99%, 98%, respectively and k= 0.938. When compared to CFT, the sensitivity, specificity and accuracy of the WB was 97%, 98% and 97%, respectively and k= 0.929. The WB developed and standardized in the present study is a serological test with potential use as a confirmatory test for the diagnosis of bovine brucellosis.(AU)

A brucelose é uma doença infectocontagiosa, causada por bactérias do gênero Brucella spp., com diagnóstico baseado no emprego de técnicas sorológicas. Objetivou-se neste estudo desenvolver e padronizar um teste Western blotting (WB) para detecção de anticorpos contra B. abortus. Foram analisados dois grupos de amostras bovinas: grupo I, com 60 amostras de animais verdadeiros positivos e verdadeiros negativos vacinados (30 amostras positivas de animais infectados e positivos nos testes de antígeno acidificado tamponado (AAT), 2 - mercaptoetanol (2 - ME), soroaglutinação lenta em tubos (SAT) e fixação do complemento e de 30 amostras negativas no AAT); grupo II, com 383 amostras de campo, sendo 90 soropositivas e 293 soronegativas no TFC. O resultado da análise do WB revelou peso molecular ≤20kDa como sendo a área mais reativa e característica para identificação e separação dos animais infectados dos não infectados. A sensibilidade, a especificidade e a acurácia do WB, quando este foi comparado com o AAT, foram, respectivamente, 93%, 99% e 98%, e k= 0,938. Quando comparadas com a TFC, a sensibilidade, a especificidade e a acurácia foram 97%, 98% e 97%, respectivamente, e k= 0,929. O WB padronizado neste estudo mostrou-se um teste sorológico com potencial uso como teste confirmatório no diagnóstico da brucelose bovina.(AU)

Occurrence of antibodies against Leptospira spp. in donkeys of São Paulo state / Ocorrência de anticorpos contra Leptospira spp. em asininos no estado de São Paulo

Among the diseases that affect equines, bacterial diseases play an important role from a health and economic point of view, especially leptospirosis and brucellosis. The study aimed to provide information on the occurrence of anti-Leptospira spp. and anti-Brucella abortus antibodies in donkeys of São Paulo state. We found a frequency of 62.4% (53/85) antibodies against Leptospira spp. The donkeys were not seropositive for Brucella spp.(AU)

Entre as doenças que acometem os equídeos, as enfermidades bacterianas assumem um papel importante do ponto de vista sanitário e econômico, destacando-se a leptospirose e a brucelose. O estudo teve como objetivo fornecer informações sobre a ocorrência de anticorpos anti-Leptospira spp. e anti-Brucella abortus em jumentos no estado de São Paulo. Estimou-se que 62,4% (53/85) dos animais apresentavam anticorpos anti-Leptospira spp. Os jumentos estudados não foram sororreagentes contra a Brucella spp.(AU)

Occurrence of anti-Brucella abortus agglutinins in small ruminants in Sergipe / Ocorrência de aglutininas anti-Brucella abortus em pequenos ruminantes de Sergipe

The objective this study was to evaluate the occurrence of small ruminants seropositive for Brucella abortus in Sergipe, Brazil. Samples of sheep (1,200) and goats (675) serum blood was collected from 101 farms of 25 counties of the three mesoregions of the state. The technique of Acidified Buffered Acid stained with Rose Bengal (RB) was used and all samples confirmed a positive result using the 2-Mercaptoethanol technique. Four (0.21%) seropositive animals were diagnosed by technique AAT stained with RB, three sheep's (0.25%) and a goat (0.15%), were confirmed by the 2ME test. In all the positive properties, the intercropping of small ruminants with cattle was adopted, favoring the contact with the agent. The prevalence of anti-B. abortus antibodies in herds of small ruminants in Sergipe is described for the first time, and is low, however, it is important to identify seropositive animals to be discarded due to their zoonotic potential.(AU)

Objetivou-se avaliar a ocorrência de pequenos ruminantes soropositivos para Brucella abortus em Sergipe, Brasil, a partir de 1.200 amostras de soro sanguíneo de ovinos e 675 de caprinos, oriundos de 101 propriedades de 25 municípios das três mesorregiões do estado, nas quais foi empregada a técnica do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) corado com Rosa Bengala (RB) como triagem e do 2-Mercaptoetanol (2ME) como confirmatória. Foram diagnosticados 4 animais (0,21%) soropositivos pela técnica de AAT corado com RB, 3 ovelhas (0,25%) e 1 cabra (0,15%), que posteriormente foram confirmados pelo teste de 2ME. Em todas as propriedades positivas era adotada a criação consorciada de pequenos ruminantes com bovinos, favorecendo o contato com o agente causador. A ocorrência de anticorpos anti-B. abortus em rebanhos sergipanos de pequenos ruminantes é descrita pela primeira vez, e mostra-se baixa; entretanto, é importante a identificação de animais soropositivos para que sejam descartados, devido seu potencial zoonótico.(AU)